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流式細(xì)胞抗體的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性維護(hù)

更新時(shí)間:2025-12-11      點(diǎn)擊次數(shù):304
  流式細(xì)胞抗體的儲(chǔ)存條件和穩(wěn)定性維護(hù)直接影響其結(jié)合活性與實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需從儲(chǔ)存環(huán)境控制、分裝與解凍操作、日常使用防護(hù)等維度規(guī)范管理,以下是步驟化、可落地的維護(hù)指南:
 
  基礎(chǔ)儲(chǔ)存條件把控
 
  長(zhǎng)期儲(chǔ)存:未開封的流式細(xì)胞抗體,優(yōu)先置于 **-20℃或 - 80℃低溫冰箱 ** 凍存,其中熒光標(biāo)記抗體建議存放于 - 80℃以減少熒光素降解;避免將抗體存放于冰箱門處(溫度波動(dòng)大),應(yīng)放置在冰箱內(nèi)部穩(wěn)定區(qū)域。
 
  短期儲(chǔ)存:開封后且短期內(nèi)(1-2 周)會(huì)使用的抗體,可在 2-8℃冷藏保存,無(wú)需反復(fù)凍融;注意避光保存,所有熒光標(biāo)記抗體都需全程避光,防止熒光淬滅。
 
  特殊抗體儲(chǔ)存:偶聯(lián)酶的流式抗體(如 HRP 偶聯(lián)抗體)需嚴(yán)格避免反復(fù)凍融,且冷藏時(shí)需密封防污染;生物素化抗體需與疊氮鈉分開儲(chǔ)存,防止疊氮鈉影響生物素活性。
 
  科學(xué)分裝與解凍操作
 
  分裝原則:收到抗體后,立即在無(wú)菌條件下將母液分裝為小體積(如 10μL、20μL)的工作液,每管為單次實(shí)驗(yàn)用量,避免因反復(fù)凍融導(dǎo)致抗體蛋白變性、活性下降。
 
  解凍要求:凍存的抗體需在室溫或 2-8℃條件下緩慢解凍,嚴(yán)禁直接溫水浴或高溫加速解凍;解凍后輕輕顛倒混勻,禁止劇烈渦旋,防止抗體聚集體形成。
 
  日常使用與穩(wěn)定性監(jiān)測(cè)
 
  使用前平衡:冷藏或解凍后的抗體,需在室溫下平衡 15-30 分鐘后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn),避免溫度差異影響抗體與抗原的結(jié)合效率。
 
  污染防控:取用抗體時(shí)使用無(wú)菌吸頭,避免交叉污染;開封后的抗體需及時(shí)密封,若發(fā)現(xiàn)抗體溶液出現(xiàn)渾濁、沉淀、顏色變深,說(shuō)明已失活,需立即丟棄。
 
  活性驗(yàn)證:建議每 3-6 個(gè)月對(duì)儲(chǔ)存的抗體進(jìn)行一次活性驗(yàn)證,通過(guò)已知陽(yáng)性細(xì)胞樣本的染色實(shí)驗(yàn),對(duì)比熒光強(qiáng)度和陽(yáng)性率,判斷抗體是否保持有效結(jié)合能力;若熒光信號(hào)顯著減弱,需更換新抗體。
 
  額外穩(wěn)定性維護(hù)注意事項(xiàng)
 
  避免抗體接觸強(qiáng)氧化劑、去污劑等化學(xué)物質(zhì),儲(chǔ)存容器需選擇無(wú)酶、低吸附的離心管,減少抗體蛋白的非特異性吸附。
 
  長(zhǎng)途運(yùn)輸時(shí),需用干冰或冰袋維持低溫環(huán)境,確保運(yùn)輸過(guò)程中溫度波動(dòng)在允許范圍內(nèi),到貨后立即檢查抗體狀態(tài)并及時(shí)入庫(kù)存放。
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